當前位置：
固相萃取小柱的選擇
更新時間：2017-08-22
點擊次數(shù)：7030
1．固相萃取柱的選擇
- 柱填料的選擇
根據(jù)目標化合物與干擾物的差異，如極性，分子量，pka值等，選擇合適的填料。
2 固相萃取柱規(guī)格的選擇
對于反相、正相和吸附型固相萃取柱來說，被萃取樣品的質(zhì)量不超SPE柱填料的5%；
離子交換型的固相萃取柱，必須考慮離子交換的容量。SAX和SCX其吸附容量為0.2mg/g，下表附SPE小柱的容量和洗脫參數(shù)
SPE柱上樣容量和洗脫體積的選擇
規(guī)格 | zui大上樣量 | zui小洗脫體積 |
100mg/1mL | 5mg | 250µL |
200mg/3mL | 10mg | 500µL |
500mg/6mL | 25mg | 1.2mL |
1g/6mL | 50mg | 2.4mL |
3．選擇合適的固相萃取方法
固相萃取的保留機制可分為兩種：
3-1 吸附劑（填料）保留目標化合物：絕大多數(shù)化合物應用此機制，填料保留其目標組分及少量雜質(zhì)，通過淋洗步驟去除吸附在柱上的少量雜質(zhì)，zui后選擇合適的（洗脫）溶劑把目標組分洗脫下來。
根據(jù)吸附劑的保留機理可進一步分為：
（1）反相（C18,C8,CN,Phenyl,C4,C1）
- 分析物：非極性至中等極性
- 基質(zhì)：水溶性
- 方法：
a.活化：通常用水溶性有機溶劑如甲醇活化，然后用水平衡
b.淋洗：含0-50%極性溶劑的緩沖溶液淋洗雜質(zhì)
c.洗脫：極性或非極性溶劑洗脫目標物
（2）正相（Silica, Florisil,Diol,NH2）
- 分析物：中等極性到強極性
- 基質(zhì)：非極性至中等極性
- 方法：
a.活化：非極性有機溶劑
b.洗脫：非極性有機溶劑
反相溶劑洗脫強度：
己烷
異辛烷
四氯甲烷
氯fang
二氯甲烷
*
乙mi
乙酸乙酯
丙酮
乙腈
異丙醇
甲醇
水
（3）陽離子交換（SCX,PRS,COOH）
- 分析物：陽離子（堿性）化合物
- 方法：
- 1.活化：用于非極性有機溶劑中的樣品時，可用樣品溶劑來活化；在用于極性溶劑中的樣品時，可用水溶性有機溶劑過柱后，然后用水平衡，zui后再用適當pH值的緩沖溶液進行平衡。
- 2.上樣：樣品溶液pH值要小于其pKa兩個單位（以保證其帶電荷 ）
- 3.洗脫：洗脫溶液pH值要大于其pKa兩個單位（中和分析物的電荷）
（4）陰離子交換（SAX,PSA,NH2，PAX/MAX ）
- 分析物：陰離子（酸性）化合物
- 方法：
- 1.活化：用于非極性有機溶劑中的樣品時，可用樣品溶劑來活化；在用于極性溶劑中的樣品時，可用水溶性有機溶劑活化后，然后用水平衡，zui后再用適當pH值的緩沖溶液進行平衡。
- 2.上樣：樣品溶液pH值要大于其pKa兩個單位（以保證其帶電荷 ）。
- 3.洗脫：洗脫溶液pH值要小于其pKa兩個單位（中和分析物的電荷）。
3-2 吸附劑（填料）保留雜質(zhì)：食品中色素等雜質(zhì)的去除多用此機制。填料保留雜質(zhì)而不保留或只保留極少量的目標組分，所以上樣后即開始收集目標組分，zui后用目標物所在的溶劑進一步洗脫。合并兩部分收集液。
1）．活化：以樣品所在的有機溶劑進化活化，1-2柱管體積
2）．上樣：提取液轉(zhuǎn)移至柱內(nèi)，并收集流出液
3）．洗脫：用樣品所在的有機溶劑進一步洗脫，收集流出液。合并上樣和洗脫流出液。
附：固相萃取中常見物質(zhì)和處理方法
