離心管的離心作用原理：

　　當(dāng)一個(gè)粒子（生物大分子或細(xì)胞器）在高速旋轉(zhuǎn)下受到離心力作用時(shí)，此離心力“F”由下式定義，即：F=ma =mω2 ra—粒子旋轉(zhuǎn)的加速度，m—沉降粒子的有效質(zhì)量，ω—粒子旋轉(zhuǎn)的角速度，r—粒子的旋轉(zhuǎn)半徑(cm)。通常離心力常用地球引力的倍數(shù)來(lái)表示，因而稱為相對(duì)離心力“RCF”?；蛘哂脭?shù)字乘“g”來(lái)表示，例如25000×g，則表示相對(duì)離心力為25000。

　　離心管應(yīng)用：

　　*生物樣品濃縮：包括抗原、抗體、酶、核酸或微生物

　　*組織培養(yǎng)提取物或細(xì)胞裂解液中大分子組分的純化

　　*對(duì)稀釋或從柱洗脫液預(yù)先純化的蛋白質(zhì)進(jìn)行濃縮

　　*脫鹽和緩沖液更換

　　超濾離心管使用方法和注意事項(xiàng)：

　　1、選擇合適的超濾離心管，主要考慮MWCO和濃縮體積，通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾離心管。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾離心管。

　　2、新買來(lái)的超濾是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量*過(guò)膜，冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過(guò)管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕，加入蛋白液前，超濾離心管需要插在冰上預(yù)冷。

　　3、質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快，否則直接損壞超濾膜。開(kāi)始離心超濾(離心機(jī)預(yù)冷至4度)。不同離心機(jī)的轉(zhuǎn)速rpm換算成g之后，有所不同。離心機(jī)的加速度調(diào)至低檔，減小對(duì)膜的壓力。注意，一定要等離心機(jī)達(dá)到目的轉(zhuǎn)速之后，方可離開(kāi)離心機(jī)，否則離心機(jī)出問(wèn)題時(shí)，無(wú)法抓緊時(shí)間處理，后果不可預(yù)測(cè)!