反相色譜柱：通用型分離

 

　　反相色譜柱是實(shí)驗(yàn)室常用的類型，其固定相為非極性（如C18、C8鍵合相），流動(dòng)相為極性混合溶劑（水-甲醇/乙腈），分離機(jī)理基于“相似相溶”——弱極性至中等極性化合物與固定相作用力更強(qiáng)，保留時(shí)間更長(zhǎng)。

 

　　安捷倫反相色譜柱具備高柱效與優(yōu)異峰形，尤其適合藥物、脂類、小分子有機(jī)物等分析場(chǎng)景。選擇要點(diǎn)包括：分析物為非極性或中等極性、在水相或水-有機(jī)混合溶劑中溶解性良好；需高分辨率分離或梯度洗脫方案時(shí)，反相柱是優(yōu)解。例如，藥物雜質(zhì)檢測(cè)、環(huán)境污染物分析等常規(guī)實(shí)驗(yàn)，優(yōu)先選用反相色譜柱。

 

　　正相色譜柱：極性化合物與異構(gòu)體分離利器

 

　　正相色譜柱采用極性固定相（如硅膠、氨基(-NH?)、氰基(-CN)鍵合相），流動(dòng)相為非極性溶劑（正己烷、異丙醇），通過(guò)氫鍵、偶極-偶極作用實(shí)現(xiàn)分離——極性越強(qiáng)的化合物與固定相結(jié)合越牢固，后流出體系。

 

　　安捷倫正相柱適用于糖類、氨基酸、異構(gòu)體等強(qiáng)極性或中等極性化合物分析。選擇場(chǎng)景明確：當(dāng)分析物在非極性溶劑中溶解性好，或需分離結(jié)構(gòu)相似的異構(gòu)體時(shí)，正相柱優(yōu)勢(shì)顯著。需注意，正相柱對(duì)水分敏感，需嚴(yán)格控制流動(dòng)相含水量，更適合等度洗脫模式。

 

　　HILIC色譜柱：強(qiáng)極性水溶性化合物的補(bǔ)充方案

 

　　親水相互作用色譜（HILIC）是反相、正相的重要補(bǔ)充，采用極性固定相（如裸硅膠、酰胺基）與高比例有機(jī)相-水相流動(dòng)相（乙腈-水，水相占比3%-40%），通過(guò)水膜分配與氫鍵作用保留強(qiáng)極性水溶性化合物——這類物質(zhì)在反相柱中幾乎無(wú)保留，在正相柱中溶解性不佳。

 

　　安捷倫系列專為強(qiáng)極性小分子設(shè)計(jì)，耐水性強(qiáng)、LC/MS兼容性好，尤其適合糖類、尿素、磷酸化化合物等分析，還可替代離子對(duì)色譜用于EPA方法1694。選擇關(guān)鍵：分析物為強(qiáng)極性水溶性物質(zhì)，或需匹配質(zhì)譜檢測(cè)器時(shí)，HILIC柱是理想選擇。使用時(shí)需注意保持流動(dòng)相有機(jī)相比例不低于40%，避免磷酸鹽緩沖液析出。